Современные методы диагностики туберкулёза

Общие сведения о туберкулезе

Эти микроорганизмы весьма распространены в окружающей среде. Их носителями являются люди и крупный рогатый скот. Заражением может происходить через дыхательные пути и гораздо реже алиментарным путем.

Когда бактерии туберкулеза проникают в организм, они инфицируют макрофагов и образуют бактериальные фагосомы.

Бактериальные фагосомы – это пузырьки, ограниченные однослойной мембраной, с содержимым, поглощенным клеткой в процессе эндоцитоза. Бактерии блокируют процесс дальнейшего превращения фагосомы и нарушают дальнейший клеточный лизис. Этот механизм позволяет микобактериям выживать внутри клеток хозяина. Микобактерии активно размножаются, находясь в клетках макрофагах.

После их гибели они выходят во внеклеточную среду. Дальнейшее развитие макрофагов зависит от иммунной активности организма.

Важнейшей особенностью микобактерий является их свойство длительное время находиться внутри организма человека в латентном состоянии. При влиянии определенных факторов латентная фаза, характеризующаяся отсутствием клинических проявлений, переходит в активную форму. Скрытое протекание заболевания существенно осложняет систему его диагностики особенно на ранней стадии.

Существует ряд лабораторных тестов, которые помогают выявить наличие туберкулеза на ранней стадии:

• микроскопия биологических жидкостей;
• бактериологический посев;
• серологические методы исследования;
• метод полимеразной цепной реакции.

Микроскопия

Данный способ основан на способности микобактерий окрашиваться в красный цвет при использовании специализированных красителей, на фоне того, что представители другой микрофлоры окрашиваются в синий. Этот метод имеет существенный недостаток, который заключается в том, что у него низкая степень чувствительности. Количество микобактерий для выявления должно быть достаточно большим. Чувствительность метода повышается путем применения люминесцентной микроскопии.

Для люминесцентной микроскопии применяются специальные оптические устройства и микроскопы, основной частью которых является источник ультрафиолетовых лучей и система фильтров к нему.

Серологические методы

Серологические методы диагностики относятся к высокочувствительным. Как только бацилла туберкулеза попадает в организм, иммунная система начинает вырабатывать антитела, которые блокируют ее жизнедеятельность. Эта система представляет собой один из видов защиты организма от многочисленных негативных влияний из окружающей среды.

После внедрения бактерий туберкулеза клетки иммунной системы вырабатывают антитела следующих классов:

• IgM;
• IgA;
• IgG.

Они циркулируют в кровяном русле и на их обнаружении построен серологический метод диагностики туберкулеза. В данном случае применяются специализированные тест-системы, которые основываются на химических иммунотехнологиях иммуноферментного исследования, радиоиммунного анализа и иммунохроматографических методах. Наиболее дорогостоящими считаются радиоиммунные методы диагностики туберкулеза.

Другие методы диагностики туберкулеза

Метод иммуноблота относят к подтверждающим методам диагностики туберкулеза, поскольку он дает возможность выявить несколько видов антител различных классов. Разновидностью иммуноблота можно считать метод TB-Spot, где в качестве антигенов используются два вещества, довольно специфичных именно для микобактерий (липоарабиноманнан и белок весом 38 кДа).

Что касается применения иммуноферментных методов, то данные исследования называют важнейшими из приемов в диагностике латентных форм туберкулеза. Такие технологии позволяют выявить антитела в сыворотке крови, моче, мокроте, плевральной жидкости, спинномозговой жидкости.

Бактериологический метод диагностики туберкулеза основывается на обнаружении микробактерий при выполнении посева на специализированные среды. У данного метода обнаружения туберкулезной палочки есть существенный недостаток: для того, чтобы идентифицировать бактерии при посеве на классические среды требуется до 4- 8 недель. Но при этом данный метод имеет высокую степень точности, а применение новых питательных сред и инновационного технологического оборудования позволяет определить рост бактерий уже в течение двух недель.

Метод полимеразной цепной реакции был введен в лабораторную практику после расшифровки ДНК микобактерий туберкулеза. Этот метод высоко специфичен и может реализовываться на небольшом количестве материала. Многие исследователи придерживаются мнения о том, что ПЦР метод по степени чувствительности и точности превосходит культуральный метод.

Также существуют цитологические и гистологические методы диагностики туберкулеза. Их особенность заключается в том, что они позволяют выявить характерные морфологические признаки заболевания. Например, о наличии туберкулеза может говорить обнаружение клеток Лангханса. Но необходимо понимать, что эти клетки также свидетельствуют о саркоидозе, сифилисе, бруцеллезе.

Самым распространенным методом диагностики туберкулеза является реакция Манту.

Наличие выраженной кожной реакции свидетельствует о наличии напряжённого иммунитета, то есть, что организм активно взаимодействует с возбудителем. Реакция Манту — это своего рода иммунологический тест, который показывает, есть ли в организме туберкулёзная инфекция

Результаты пробы Манту оцениваются по величине инфильтрата через трое суток.