Лекарственные средства, производные пурина

1 Пурин – конденсированная бициклическая система пиримидина и имидазола в которой два атома углерода являются общими для циклов. Сам пурин в природе не встречается, но его производные широко распространены в растительном и животном мире. Важным производным пурина является 2,6-диоксипурин (ксантин), который в небольших количествах распространен в растительном мире и организме животных. Сам ксантин в медицине не применяется, но его метилированные производные являются ценными ЛС. Медицинское применение пуриновых алкалоидов основано на их стимулирующем действии на центральную нервную систему и сердце. Действие на сердце и скелетные мышцы особенно сильно выражено у кофеина, который используется в медицинской практике как тонизирующее средство. Теобромин и теофиллин являются мочегонными и расширяющими коронарные сосуды средствами. Они входят в состав различных антигипертонических, антиастматических и других ЛС. 2 Кофеин – 1, 3, 7 – триметилксантин Впервые выделен в 1820 г., содержится в кофе бобах, в чайных листьях (до 5%). 3 Теобромин – 3,7 – диметилксантин Открыт в 1842 г., содержится в шелухе какао бобов (до 1,8%). Теофиллин – 1,3 – диметилксантина моногидрат Выделен в 1888 г. из листьев чая. 4 Кофеин трудно растворяется в воде, но его растворимость резко увеличивается в присутствии органических кислот и их солей, с целью создания водорастворимых ЛС данной группы были получены соли двойного состава. Хорошая растворимость в воде делает возможным применение данных ЛС в виде растворов в том числе и для парентерального введения. 5 1. Из растительного сырья. Используют методы многократной экстракцией водой или органическими растворителями, с последующей очисткой от балластных веществ (свинца ацетатом, магния оксидом и др.) и перекристаллизацией из воды. Но поскольку содержание алкалоидов в природных источниках невелико, были разработаны методы синтетического получения данных алкалоидов. 2. Синтетические методы можно разделить на две группы: А) Полусинтетический метод, в котором используют готовую пуриновую систему, чаще всего мочевой кислоты или гуанина, получаемых из природных веществ и вводят N-метильные группы в необходимые положения исходного пуринового производного. Б) Полный химический синтез – метод Траубе, в котором исходными продуктами служат алкильные производные мочевины и циануксусная кислота. Теофиллин и теобромин получают только синтетически. В последние годы разработаны методы получения пуриновых алкалоидов путем непосредственного метилирования ксантина диметилсульфатом. 6 7 8 Теофиллин и теобромин - не полностью метилированные производные ксантина и имеют подвижный атом водорода при азоте, который придает соединениям кислотные свойства. Теобромин имеет подвижный водород при азоте в 1-м положении, в составе имидной группы: O C O NH C В щелочной среде образуется соль - имидольная форма. Теофиллин имеет подвижный водород в 7-м положении вторичная аминогруппа имидазольного кольца: - H N N 9 Теофиллин и теобромин растворимы в кислотах, т.к. проявляют основные свойства за счет третичного азота в 9-м положении. При растворении в кислотах образуется соль органического основания и минеральной кислоты. Таким образом, теобромин и теофиллин являются амфотерными соединениями, т.к. проявляют и кислотные и основные свойства. 10 Температура плавления является важной физической константой ЛС и наряду с другими физическими характеристиками используется при определении подлинности и ориентировочного определения чистоты. Температурой плавления называют температуру, при которой происходит переход вещества из твердого состояния в жидкое. В НД она приводится, как правило, в виде интервала значений. Температуры плавления: кофеин: от 235 до 238 °С теофиллина моногидрат: от 270 до 274 °С Все ЛС данной группы имеют в своей структуре непредельные (двойные) связи и могут поглощать излучение в УФ- области. Для подтверждения подлинности используют спектрофотометрию. Спектрофотометрия основана на поглощении ЛС монохроматического излучения в УФ- области. Графическое изображение зависимости поглощения от длины волны света называется спектром. Готовят 0,001% растворы субстанций в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты. Кофеин имеет максимум поглощения при λ=273 нм. Теофиллин при λ=270 нм. В щелочных растворах теофиллина и теобромина максимум поглощения смещается в длинноволновую область λ=276 нм (теофиллин), λ=274 нм (теобромин) – такое смещение называют батохромным. 11 Для подтверждения подлинности всех перечисленных на слайде субстанций используется ИК- спектрометрия. ИК спектрометрия – метод исследования веществ, основанный на поглощении ИК излучения, в результате чего происходит усиление колебательных и вращательных движений молекул. В основе получения ИК спектра лежит облучение исследуемого образца ИК излучением с постепенно изменяющейся частотой, осуществляемое с помощью прибора – ИК спектрометра. Каждое соединение независимо от его природы имеет строго индивидуальную картину спектра. ИК спектр представляет собой график пропускания веществом инфракрасного излучения (Т, %) в зависимости от длины волны (, мкм) или частоты излучения (, см-1). 12 Общей реакцией, подтверждающей принадлежность этих алкалоидов к пуриновому ряду, является мурексидная проба. Мурексидная проба – основана на окислении пуриновых алкалоидов, в качестве окислителей м.б. использованы пергидроль, бромная вода, и др. Происходит разрыв имидазольного цикла, образуются: мочевина, или метилмочевина, производное аллоксана (полностью окисленная форма) и производное диаллуровой кислоты (частично окисленная форма), которые реагируют между собой с образованием тетраметилаллоксантина. 13 При добавлении аммиака происходит переконденсация и образуется аммонийная соль тетраметилпурпуровой кислоты – мурексид. Реакция фармакопейная. 14 Реакция с раствором йода на кофеин является фармакопейной. В отличие от других алкалоидов, кофеин образует полийодидный комплекс (за счет третичного атома азота в 9-м положении) только в присутствии хлористоводородной кислоты. Данная реакция позволяет не только подтвердить подлинность кофеина, но и проверить примесь сопутствующих алкалоидов. По методике – субстанцию кофеина растворяют в горячей воде, охлаждают, прибавляют раствор йода – не должно быть ни осадка, ни помутнения, при прибавлении нескольких капель хлористоводородной кислоты должен образовываться бурый осадок. 15 Для подтверждения подлинности теобромина используются реакции солеобразования с солями тяжелых металлов, которые протекают в щелочной среде за счет имидной группы (имидольной формы). Реакция с кобальта хлоридом является фармакопейной. Образуется осадок серовато-голубого цвета. Реакция используется и практике внутриаптечного контроля. 16 Для подтверждения подлинности теофиллина используют реакцию солеобразования с солями тяжелых металлов в щелочной среде (аналогично теобромину). Теофиллин проявляет более выраженные кислотные свойства за счет вторичной аминогруппы имидазольного кольца. Вначале теофиллин переводят в солевую форму, при добавлении раствора натрия гидроксида и далее при прибавлении раствора кобальта хлорида образуется соль в виде белого осадка с розоватым оттенком. Данная реакция позволяет отличить теофиллин от теобромина. Используется во внутриаптечном контроле для подтверждения подлинности теофиллина. 17 Аналогично протекает реакция солеобразования теофиллина и теобромина с раствором серебра нитрата (в щелочной среде). Серебряная соль теофиллина представляет собой желеобразный осадок, серебряная соль теобромина – коричневую желатинообразную массу. Данная реакция фармакопейная для теобромина и не фармакопейная для теофиллина, позволяет отличить ЛС друг от друга. 18 При подтверждении подлинности кофеина бензоата натрия доказывают оба компонента соли. Согласно ФС.2.1.0117.18 подлинность кофеина подтверждают после его извлечения хлороформом из щелочного раствора субстанции. Хлороформное извлечение упаривают, высушивают до постоянной массы, определяют температуру плавления сухого остатка, снимают ИК-спектр, полученный спектр должен соответствовать спектру стандартного образца кофеина. Для подтверждения подлинности натрия бензоата готовят раствор субстанции 1:100 и проводят реакцию с железа (III) хлоридом, в результате которой образуется розовато-желтый осадок основного бензоата железа: COONa + 6 2FeCI3 + 10 H2O COO 3+ Fe * Fe (OH)3 * 7H2O + 6NaCI + 3 C6H5COOH 3 Катион натрия доказывают реакций Б – окрашивание бесцветного пламени в желтый цвет. 19 При подтверждении подлинности аминофиллина доказывают теофиллин и этилендиамин. Теофиллин определяют после его вытеснения из соли раствором хлористоводородной кислоты разведенной: O H3C O H . N N N CH2 NH2 + 2HCI N CH2 NH2 CH3 2 O H3C N CH2 NH2 + 2 O H N N N . 2HCI CH2 NH2 CH3 Осадок выделившего в результате реакции теофиллина отфильтровывают, высушивают до постоянной массы, определяют температуру плавления и снимают ИК-спектр, полученный спектр должен соответствовать спектру стандартного образца теофиллина. Этилендиамин доказывают в водном растворе субстанции реакцией комплексообразования с раствором меди (II) сульфата, которая протекает за счет первичной алифатической аминогруппы. Кроме того, подлинность аминофиллина подтверждают спектрофотометрическим методом в УФ-области: готовят 0,001% раствор субстанции в 0,1М хлористоводородной кислоте и снимают спектр поглощения в диапазоне длин волн от 250 до 300 нм. Максимум поглощения должен быть при λ = 270 ± 2 нм. Поглощение УФ-излучения обусловлено двойными связями в структуре теофиллина. 20 При проверке доброкачественности субстанций контролируются следующие показатели:  прозрачность раствора;  цветность раствора;  общие примеси;  специфические (родственные) примеси. 21 Для раствора субстанции аминофиллина допускается небольшая цветность, испытуемый раствор сравнивают с эталоном GY6 - шкала зеленовато-желтых оттенков, возможное изменение цвета раствора связано с нестабильностью этилендиамина, входящего в состав соли. Для субстанций теофиллина моногидрата и теобромина показатели «Прозрачность раствора» и «Цветность раствора не контролируются». 22 Общие примеси – указывают на степень очистки ЛС, не имеют специфического действия, но в больших количествах снижают фармакологическую активность ЛС. Хлориды – определяют реакцией осаждения раствором серебра нитрата в присутствии азотной кислоты: CI- + AgNO3 → AgCI↓ + NO3 - (опалесценцию, появившуюся в испытуемом растворе, сравнивают с опалесценцией эталонного раствора, на темном фоне, в проходящем свете). Сульфаты – определяют реакцией осаждения раствором бария хлорида в присутствии хлористоводородной кислоты: SO42- + BaCI2 → BaSO4↓+ 2CI- (помутнение, появившееся в испытуемом растворе, сравнивают с помутнением эталонного раствора, на темном фоне, в проходящем свете). Сульфатная зола и тяжелые металлы (препарат предварительно обрабатывают концентрированной серной кислотой, которая обугливает, окисляет органические вещества, а соли превращает в более термически стойкие и менее летучие сульфаты. Образовавшаяся сульфатная зола используется для последующего определения примеси тяжёлых металлов). Для определения примеси тяжелых металлов используют реакцию осаждения натрия сульфидом – образуются окрашенные осадки сульфидов тяжелых металлов (черные, коричневые): Pb2+ +Na2S→ PbS↓ + 2Na+ (окраска, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать окраску эталонного, растворы просматривают на белом матовом фоне, при дневном отраженном свете, по оси пробирок). 23 Потеря в массе при высушивании происходит за счет влаги и некоторых летучих веществ, например, летучих кислот, аминов, диоксида углерода и др. Образец субстанции сушат до постоянной массы при определенной температуре, условия и температура указываются в ФС. Таким образом контролируется содержание влаги (воды) и возможных летучих примесей. Кофеин и теофиллин умеренно или мало растворимы в воде, не являются гигроскопичными соединениями и поэтому потеря в массе при высушивании допускается не более 0,5%. Кофеин бензоат натрия легко растворим в воде, входящий в состав ЛС натрия бензоат (от 58,0% до 62,0%) является солью, образованной сильным минеральным основанием и слабой органической кислотой и хорошо поглощает влагу из воздуха, и поэтому потеря в массе при высушивании допускается до 5%. Для теофиллина моногидрата содержание кристаллизационной воды контролируется показателем «Вода», который определяется химическим методом К.Фишера, содержание воды должно быть не менее 8% и не более 9,5%. В субстанции аминофиллина так же контролируется показатель «Вода» (методом К.Фишера), содержание воды допускается до 4,5%, это связано с гигроскопичностью субстанции (определение потери в массе при высушивании в данном случае невозможно, т.к. в состав ЛС входит этилендиамин, который при нагревании будет улетучиваться). 24 Для субстанции кофеина контролируется показатель «Кислотность или щелочность», определение проводят визуально ориентировочно с использованием кислотно-основного индикатора – бромтимолового синего (рН интервал перехода окраски 5,8 – 7,4; от желтой к синей), изменение окраски индикатора в водном растворе субстанции должно происходить от прибавления указанного в ФС количества 0,02М раствора натрия гидроксида или 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты. Таким образом контролируются примеси кислотного и основного характера (т.к. при получении кофеина используются как кислотные так и щелочные реагенты). Родственные примеси определяют методом ВЭЖХ – высокоэффективная жидкостная хроматография (жидкостная хроматография высокого давления) – это метод колоночной хроматографии, в котором подвижной фазой служит жидкость, движущаяся под давлением через хроматографическую колонку, заполненную неподвижной фазой (сорбентом). Для проведения испытания готовят раствор субстанции в подвижной фазе (буферный раствор с рН4,5), при проведении испытания используют стандартные образцы перечисленных на слайде примесей. Суммарное содержание всех примесей должно быть не более 0,1%. Контролируется содержание сопутствующих, побочных и промежуточных продуктов при получении субстанции кофеина. Примеси специфические, допустимые. Посторонние алкалоиды – кофеин является очень слабым органическим основанием и в отличие от других алкалоидов не образует осадок с реактивом Майера, так контролируется присутствие других алкалоидов. Примеси специфические, недопустимые. Органические примеси - контролируются путем приготовления растворов субстанции в серной кислоте концентрированной и азотной кислоте концентрированной. Растворы должны быть прозрачными и бесцветными. При наличии примесей органических веществ, они будут окисляться концентрированными кислотами, что будет сопровождаться появлением окраски или образованием окрашенных осадков (продуктов окисления). Примеси специфические – недопустимые. 25 В субстанциях теофиллина и теофиллина моногидрата в качестве родственных примесей контролируется содержание теобромина – побочного продукта синтеза. Определение проводят методом ВЭЖХ, используют стандартный образец теобромина. Примесь специфическая допустимая. Суммарное содержание всех родственных примесей должно быть не более 0,5%. В субстанции теобромина контролируется содержание примеси кофеина. Определение проводят гравиметрическим методом. Навеску субстанции теобромина растворяют в 0,1 М растворе натрия гидроксида, при этом теобромин образует соль за счет имидной группы (переходит в имидольную форму): O N HN O ONa CH3 + N CH3 N N N NaOH O CH3 + N H2O N CH3 и затем добавляют 10 мл хлороформа и сильно встряхивают. При наличии кофеина он будет извлекаться в хлороформ (легко растворим в хлороформе), натриевая соль теобромина (как полярное соединение) останется в водном слое. Хлороформное извлечение отделяют, упаривают и высушивают до постоянной массы сухой остаток взвешивают. Остаток не должен превышать 0,5%. Примесь специфическая допустимая. 26 В субстанции аминофиллина качестве родственных примесей контролируется содержание теобромина – побочного продукта синтеза теофиллина (компонента аминофиллина). Определение проводят методом ВЭЖХ (как для субстанции теофиллина), используют стандартный образец теобромина. Примесь специфическая допустимая, должно быть не более 0,1%. Для субстанции кофеина бензоата натрия контролируется показатель «Кислотность или щелочность», определение проводят визуально ориентировочно с использованием кислотно-основного индикатора – фенолфталеина (рН интервал перехода окраски 8,2 – 10,0; от бесцветной до ярко розовой). Раствор субстанции не должен окрашиваться в розовый цвет при прибавлении раствора фенолфталеина, окраска должна появляться от прибавления не более 0,15 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида. Наличие примесей основного характера регламентируется окраской индикатора – не д.б. розового окрашивания, рН д.б. меньше 8,2 (в состав ЛС входит натрия бензоат – соль образованная сильным основанием и слабой кислотой); наличие примесей кислотного характера регламентируется объемом 0,05М раствора натрия гидроксида, который необходимо добавить до получения щелочной рН среды, в случае присутствия примесей кислотного характера натрия гидроксид будет расходоваться на их нейтрализацию и смещение рН до 10,0 не произойдет, окраска не появится. Таким образом, контролируются примеси кислотного и основного характера, т.к. при получении кофеина бензоата натрия используются как кислотные так и щелочные реагенты. Примеси специфические недопустимые. 27 Газовая хроматография – это метод разделения летучих соединений, основанный на различии в распределении компонентов анализируемой смеси в системе несмешивающихся и движущихся относительно друг друга фаз, где в качестве подвижной фазы выступает газ (газ-носитель), а в качестве неподвижной фазы – твердый сорбент или жидкость, нанесенная на твердый носитель или внутренние стенки колонки. 28 Количественное определение кофеина в субстанции проводят ацидиметрическим методом в среде протогенного растворителя. Метод основан на солеобразовании основания кофеина с хлорной кислотой в среде протогенного растворителя, усиливающего основные свойства кофеина. Кофеин проявляет слабые основные свойства за счет третичной аминогруппы в 9-м положении. В основе определения лежат следующие процессы: 1-я стадия – диссоциация растворителя: в качестве растворителя используют уксусный ангидрид, который в растворе диссоциирует с образованием ацетилий-иона и ацетат-иона; 2-я стадия – ионизация основания: при растворении субстанции кофеина в уксусном ангидриде происходит усиление основных свойств за счет ионизации третичной аминогруппы в 9-м положении; 29 3-я стадия – перенос протона: протон от хлорной кислоты в реакционной смеси переходит к ацетат-иону; 4-я стадия – солеобразование: в процессе титрования образуются соль – перхлорат кофеина, ацетат-ион и ион ацетилия; 30 5-я стадия – регенерация растворителя: выделившиеся на 4-й стадии ацетат-ион и ион ацетилия реагируют с образованием уксусного ангидрида. Под чертой приведено суммарное уравнение реакции. Точку эквивалентности определяют потенциометрически. Коэффициент стехиометричности равен 1. 31 Количественное определение теофиллина и теобромина проводят алкалиметрическим методом – способ косвенного титрования. Метод основан на свойстве теофиллина (за счет вторичной аминогруппы имидазольного цикла) и теобромина (за счет имидной группы) вступать в реакцию солеобразования с серебра нитратом, с выделением эквивалентного количества азотной кислоты, которую титруют раствором натрия гидроксида (алкалиметрия – вариант нейтрализации). Навески субстанций растворяют в воде при нагревании (т.к. они мало растворимы при температуре 200С), при определении теобромина, раствор серебра нитрата прибавляют к горячему раствору, при определении теофиллина к охлажденному. Выделившуюся азотную кислоту титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида, в качестве индикаторов используют: при определении теофиллина – бромтимоловый синий (титруют до появления синего окрашивания); при определении теобромина – феноловый красный (титруют до появления фиолетовокрасного окрашивания). Коэффициент стехиометричности равен 1. Метод фармакопейный, а так же используется во внутриаптечном контроле. 32 Количественное определение кофеина можно проводить йодометрическим методом. Метод основан на образовании полийодидного комплекса кофеина за счет третичной аминогруппы в 9-м положении. Используют способ обратного титрования, т.к. реакция протекает во времени. Определение проводят в присутствии хлористоводородной кислоты. Образовавшийся осадок полийодидного комплекса отфильтровывают, в фильтрате избыток йода титруют раствором натрия тиосульфата. Коэффициент стехиометричности ½. Параллельно проводят контрольный опыт. В качестве индикатора используют раствор крахмала. 33 При количественном определении солей двойного состава определяют содержание каждого компонента соли. Для количественного определения кофеина бензоата натрия используют ацидиметрию в среде протогенного растворителя. Точку эквивалентности устанавливают потенциометрически. Вначале титруется бензоат натрия, по первому скачку потенциала устанавливают объем титранта пошедший на определение натрия бензоата. Уравнение реакции при титрования натрия бензоата можно представить следующим образом: O H3C O COONa COOH H3C O + HCIO4 + NaCIO4 Коэффициент стехиометричности равен 1. Затем титруется основание кофеина, по второму скачку потенциала определяют объем титранта пошедший на определение кофеина (уравнение реакции см. на 29 – 31 слайдах). Рассчитывают содержание каждого компонента соли, согласно требованиям ФС кофеина должно быть не менее 38,0% и не более 42,0%, натрия бензоата не менее 58,0% и не более 62,0% в пересчете на сухое вещество. 34 В условиях аптеки определение проводят по одному из компонентов соли. По кофеину определение можно провести йодометрическим методом (химизм см. на слайде 33), но метод достаточно трудоемкий для условий аптеки: используется способ обратного титрования, затрачивается определенное количество времени, кроме того, осадок полийодидного комплекса необходимо отфильтровать и далее, определенную часть (объем) фильтрата титруют натрия тиосульфатом. Обычно во внутриаптечном контроле определение проводят по натрия бензоату ацидиметрическим методом по варианту вытеснения (хлористоводородная кислота вытесняет бензойную из её соли). Для извлечения выделяющейся в процессе титрования бензойной кислоты добавляют эфир (т.к. бензойная кислота плохо растворима в воде, осадок будет мешать определению точки эквивалентности, кроме того, бензойная кислота может сдвигать равновесие реакции в обратную сторону). В качестве индикатора используют метиловый оранжевый, титруют до розового окрашивания водного слоя. Коэффициент стехиометричности равен 1. 35 При количественном определении аминофиллина по ФС определяют содержание теофиллина и этилендиамина. Этилендиамин определяют ацидиметрическим методом по варианту нейтрализации. Этилендиамин проявляет основные свойства за счет первичной алифатической аминогруппы, титруется хлористоводородной кислотой как двукислотное основание, коэффициент стехиометричности ½, химизм представлен на слайде. В качестве индикатора используют раствор бромкрезолового зеленого (синего), титруют до появления зеленого окрашивания. Теофиллин определяют алкалиметрическим методом косвенного титрования, химизм и обоснование приведены на слайде 32. Предварительно навеску субстанции высушивают при температуре 135±50С, таким образом из субстанции удаляю этилендиамин (улетучивается при нагревании), т.к. он мешает определению теофиллина. Этилендиамин является достаточно сильным органическим основанием и будет реагировать с азотной кислотой, образующейся при реакции теофиллина с серебра нитратом, результаты определения будут занижены. Согласно требованиям ФС теофиллина должно быть не менее 84,0% и не более 87,4%, этилендиамина не менее 13,5% и не более 15,0% в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество. 36 Во внутриаптечном контроле количественное определение аминофилинна проводят ацидиметрическим методом по этилендиамину. Для того, чтобы перейти от этилендиамина к аминофиллину рассчитывают титр условный, для этого необходимо знать сколько содержится этилендиамина в субстанции из которой был изготовлен ЛП. Все субстанции в аптечную организацию поступают с копией заводского паспорта (протокол анализа производителя), в котором указано содержание этилендиамина по результатам контроля завода-производителя (для субстанций зарубежного производства этот документ может назваться сертификатом анализа). При расчете титра аминофиллина (эуфиллина) титр этиледиамина умножают на 100% и делят на процентное содержание этилендиамина в субстанции (из которой был приготовлен ЛП). 37 Пример решения задачи. Количественное определение аминофиллина проводят по этилендиамину ацидиметрическим методом по варианту нейтрализации (за счет основных свойств первичной алифатической аминогруппы). Коэффициент стехиометричности ½. 38 Сначала рассчитывают титр этилендиамина по хлористоводородной кислоте (титранту), учитывая коэффициент стехиометричности ½ (из уравнения реакции ЛС с титрантом), молекулярную (молярную) массу этилендиамина и молярность (молярную концентрацию) титранта. Затем рассчитывают титр аминофиллина (эуфиллина) по хлористоводородной кислоте, для этого рассчитанный титр этилендиамина по хлористоводородной кислоте умножают на 100% и делят на процентное содержание этилендиамина в субстанции – 14% (дано по условию задачи). Далее рассчитывают содержание аминофиллина (эуфиллина) в лекарственном препарате по традиционной формуле: с учетом объема титранта, пошедшего на титрование, коэффициента поправки к молярности титранта, массы одного порошка (по прописи), и навески порошка, которую взяли для анализа. 39 ЛС данной группы содержат в своей структуре непредельные связи (в имидазольном цикле, оксогруппы в пиримидиновом кольце) и могут поглощать излучение в УФобласти. В готовых лекарственных средствах, например, в таблетках, для количественного определения применяется спектрофотометрический метод, основанный на свойстве растворов ЛС поглощать монохроматическое излучение в УФобласти. Расчеты проводят по стандартному образцу, в качестве которого используются субстанции соответствующих ЛС. 40 41 42