Сравнительное изучение фенотипических характеристик одногенных и полигенных реассортантов, полученных с помощью обратной генетики между холодоадаптированным (ХА) штаммом донором аттенуации А/Краснодар/101/35/59(Н2N2) и вирулентным штаммом А/WSN/33(H1N1), показало, что РВ1-ген ХА штамма содержит одну из ключевых детерминант, определяющих ts-фенотип и att-фенотип этого штамма. В работе была исследована возможность переноса мутации из РВ1-гена ХА штамма, ответственного за аттенуацию этого штамма (147 Ile Thr) в геном вирулентного штамма А/WSN/33 с целью его аттенуации. Мутация была получена с помощью сайт-специфического мутагенеза. Исследование фенотипических признаков полученного варианта W9 показало, что полученный вариант приобрел ts-фенотип и характеризовался резко сниженной вирулентностью для мышей. Обсуждается возможность использования сайт-специфического мутагенеза для получения вакцинных штаммов вируса гриппа типа А.
Цель. Изучение биологических свойств аттенуированных вариантов штамма А/WSN/33(Н1N1) вируса гриппа А, полученных с помощью сайт-специфического мутагенеза РВ2-гена. Материалы и методы. С помощью методов обратной генетики получены сайт-специфические мутанты штамма А/WSN/33, имеющие в РВ2-гене ts-мутации из генома холодоадаптированных (ХА) штаммов-доноров аттенуации: А/Энн Арбор/6/60(Н2N2), А/Ленинград/134/17/57(Н2N2), А/Краснодар/101/35/59 (Н2N2). У полученных сайт-специфических мутантов исследован ts-фенотип, att-фенотип, иммуногенность и защитная эффективность при гомологичном и гетерологичном контрольном заражении. Результаты. Показано, что включение в РВ2-ген вирулентного штамма А/WSN/33 как единичных ts-мутаций, так и комбинации ts-мутаций из генома известных ХА штаммов-доноров аттенуации ведет к изменению tsи att-фенотипа полученных сайт-специфических мутантов. Наблюдалось падение способности к размножению при повышенной температуре и снижение вирулентности для мышей при интрана...