Проведено исследование механизмов токсического действия 1,1-диметилгидразина (несимметричного диметилгидразина (НДМГ)) на живые системы на примере бактериальной клетки с помощью lux -биосенсоров. В настоящей работе были сконструированы гибридные плазмиды, содержащие luxCDABE-гены-репортёры, кодирующие бактериальную люциферазу под контролем стрессовых индуцируемых промоторов. Клетки Escherichia coli, содержащие данные гибридные плазмиды, являются lux -биосенсорами. Благодаря полученным lux -биосенсорам, специфически детектирующим окислительный стресс, повреждения белков и ДНК, было показано, что основными промоторами, открывающимися при действии на бактериальную клетку НДМГ, являются промоторы PkatG, PcolD (или PrecA) и PalkA. Активация промоторов PkatG, PcolD в присутствии НДМГ определяется перекисью водорода, образующейся в результате восстановления атмосферного кислорода. Показано, что активация lux -биосенсора E. coli MG1655 (pAlkA-lux ) наступает при появлении в среде продуктов ...
Изучалась способность медицинского препарата диоксидина вызывать образование антибиотикорезистентности у бактерий. Исследование проводилось с помощью биолюминесцентного теста с использованием рекомбинантных штаммов Escherichia coli MG 1655 (pSoxS-lux), MG1655 (pKatG-lux), MG1655 (pRecA-lux), MG1655 (pColD-lux), в геном которых введены плазмиды с опероном luxCDABE фотобактерии Photorhabdus luminescens, поставленным под контроль соответствующих стресс-индуцируемых промоторов E. coli, а также классических методик учета частоты образования устойчивых мутантов для непатогенных и условнопатогенных штаммов Escherichia coli, Bacillus amyloliquefaciens и Klebsiella pneumoniae. Показано, что диоксидин вызывает индукцию промоторов PrecA и Pcda у Escherichia coli MG1655, что свидетельствует об индукции SOS-ответа в бактериальной клетке. Индукция промотора Pcda была выше, чем PrecA. Максимального значения коэффициент индукции достигал при концентрации диоксидина 2,25 • 10-5 М. Кроме того, данный...