Птерин и птериновые производные
Птерин — это природное производное птеридина, содержащее заместители в положениях С2 и С4. Для птеринов характерна прототропная таутомерия.
В структуру молекул лекарственных веществ группы птерина входят фрагменты 6-метилптерина, S-глутаминовой и n-аминобензойной кислот. Соединения являются оптически активными, что используется в контроле качества субстанций.
Значение птериновых производных:
- факторы роста микроорганизмов;
- дополнительные факторы питания животных;
- птериновые витамины (фолиевая кислота, или витамин В), обладают противоанемическим действием;
- фолиевая кислота входит в ферментную систему холинэстеразы, ускоряющей гидролиз ацетилхолина.
Лекарственные препараты, производные птерина: фолиевая кислота; метотрексат; производные изоаллоксазина (рибофлавина мононуклеотид).
Методы анализа фолиевой кислоты
Фолиевая кислота состоит из птерина, связанного с ним (при помощи метиленовой группы) остатка п-аминобензойной кислоты, остатка L- глутаминовой кислоты. Проявляет амфотерный характер, обусловленный наличием нескольких атомов азота и карбоксильных групп. Фолиевая кислота представляет собой кристаллы желто - оранжевого цвета, гигроскопичные, без запаха и вкуса, на свету разлагаются, практически не растворимые в воде и органических растворителях (ацетоне, этаноле, эфире, хлороформе), хорошо растворимые в растворах щелочей и в разбавленных минеральных кислотах. Фолиевая кислота является нестойким веществом, легко распадается под действием щелочей и кислот, окислителей и восстановителей, нагревания и света.
Фолиевая кислота участвует в обратимых окислительно-восстановительных превращениях. При гидрировании в щелочной среде реакция идет по двойной связи 7-8 с образованием дигидровитамина, легко окисляемого кислородом воздуха в исходную кислоту. Быстро и необратимо разрушают фолиевую кислоту ультрафиолетовые лучи.
Высокая лабильность фолиевой кислоты обусловлена наличием атеринового ядра, включающего амино- и гидроксигруппы, которые дают возможность таутомерным превращениям, а также наличием пептидных связей, содержащих остатки глутаминовых кислот. За счет наличия в птериновой части молекулы фолиевой кислоты третичных атомов азота и гидроксильных групп образуются внутрикомплексные соединения с солями свинца, меди (II), кобальта, серебра, железа (III) (окрашенные и не растворимые в воде).
Окраска растворов солей металлов при добавлении к фолиевой кислоте:
- ацетат свинца — лимонно-желтый осадок;
- сульфат меди (II) — зеленый;
- нитрат кобальта — темно-желтый;
- нитрат серебра — желто-оранжевый;
- хлорид железа (III) — красно-желтый.
Количественное определение фолиевой кислоты:
- Метод фотоэлектроколориметрии (при 550 нм), в основе которого лежит реакция образования азоткрасителя.
- Флуориметрический метод.
- Полярографический метод.
- УФ-спектрофотометрия (при длине волны 365 нм).
- Обратное алкалиметрическое определение.
Фолиевая кислота является составной частью витаминов группы В, принимает участие в синтезе нуклеиновых кислот и аминокислот. Используется для усиления эритропоэза при отдельных видах анемий, лейкопениях, вызванных лекарственными препаратами и ионизирующей радиацией.
Методы анализа метотрексата
Метотрексат — это желтый или желто-оранжевый кристаллический порошок, плохо растворимый в воде и органических растворителях (этаноле, эфире, дихлорэтане), хорошо растворимый в разведенных растворах карбонатов и щелочей.
УФ-спектр 0,001% раствора метотрексата должен иметь в растворе гидроксида натрия (0,1 М) максимумы поглощения в области нм: 258 нм, 303 нм, 370 нм. Отношение оптических плотностей при 303 и 370 нм составляет 2,8 к 3,3. Метотрексат окисляется перманганатом калия (хлоратом калия), в УФ-свете дает голубую флуоресценцию.
Количественное определение метотрексата:
- Хроматоспектрофотометрия.
- Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Метотрексат требует осторожного обращения, необходимо избегать его попадания на кожу и слизистые оболочки. Метотрексат является противоопухолевым средством, его используют при лечении острых лейкозов, рака легкого, злокачественных образований молочной железы, матки.
Методы анализа производных изоаллоксазина
Производные изоаллоксазина — это флавиновые витамины, или витамин В2 рибофлавин.
Рибофлавина мононуклеотид кристаллический порошок со слабым специфическим запахом, желто-оранжевого цвета, горький на вкус. Гигроскопичен, на свету неустойчивый. Рибофлавин практически не растворим в воде и органических растворителях (ацетоне, этаноле, бензоле, эфире, хлороформе), хорошо растворим в уксусной и хлороводородной кислотах, растворах едких щелочей.
Нейтральные растворы рибофлавина мононуклеотида имеют интенсивную желто-зеленую окраску при флуоресценции. В щелочных и кислых средах флуоресценция исчезает. Витамин В2 устойчив к нагреванию, кислой среде, чувствителен к щелочной среде. Обладает высокой светочувствительностью в зависимости от интенсивности облучения и окружающей среды.
Рибофлавина мононуклеотид образует в нейтральных растворах с солями некоторых металлов (Fe, Cu, Zn, Ag, Ni, Co, Mn) комплексные хелатные соединения. В кислых водных растворах рибофлавин с нитратом ртути дает оранжевое окрашивание. Для установления в рибофлавина мононуклеотиде допустимого количества светопоглощающих примесей определяют оптическую плотность его растворов при разных длинах волн. Содержание влаги по методу Фишера должно быть не более 1,5%.
Количественное определение рибофлавина мононуклеотида:
- УФ-спектрофотометрия в среде натрия ацетата и уксусной кислоты (при длине волны 267 нм).
- Флуориметрическое исследование (при длине волны 530 нм).
- Спектрофотометрия (при длине волны 445 нм).
- Метод Малапрада (периодатный метод).
Рибофлавина мононуклеотид широко используется в офтальмологии для лечения катаракты, конъюнктивита, язвы роговицы, кератита. Витамин В2 назначают при гипо - и авитаминозе, при незаживающих язвах и ранах, болезни Боткина, лучевой болезни.
