Трансфекция

Основы биохимии и молекулярной биологии

процесс протекает в 4 стадии: разрезание ДНК эндонуклеазами рестрикции, лигирование ДНК с вектором, трансфекция

Статья от экспертов

Трансфекция экзогенной ДНК клеток яйцевода кур

ХОНДРОИТИНСУЛЬФАТ УВЕЛИЧИВАЕТ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ТРАНСФЕКЦИИ КЛЕТОК КОМПЛЕКСАМИ ДНК-ПЭИ

Введение. Одной из самых популярных невирусных систем доставки генотерапевтических конструкций являются комплексы ДНК с носителями на основе полиэтиленимина (ПЭИ). Ряд недостатков, связанных с отсутствием адресной доставки и повышенной цитотоксичностью, преодолевается добавлением в состав комплексов вспомогательных молекул. Примером последних служит хондроитинсульфат (далее ХС). Цель данной работы - оценка влияния ХС на трансфекционные свойства комплексов ДНК-ПЭИ при разных условиях их приготовления и протоколах трансфекции. Материал и методы. Комплексы готовили в растворах с высокой и низкой ионной силой. Трансфекцию клеток С26 проводили согласно двум протоколам, различающимся по наличию в среде сыворотки. Основными параметрами оценки эффективности трансфекции выступали доля трансфицированных клеток, уровень экспрессии трансгена и выживаемость клеток. Результаты. У двухкомпонентных комплексов ДНК-ПЭИ, приготовленных в условиях низкой или высокой ионной силы, при использовании разны...