Справочник от Автор24
Найди эксперта для помощи в учебе
Найти эксперта
+2

Вектор плазмидный

Предмет Биотехнология
Разместил 🤓 CristiRevi
👍 Проверено Автор24

вектор, полученный на основе репликона бактериальной плазмиды.

Научные статьи на тему «Вектор плазмидный»

Конструирование плазмидного вектора для получения химерных антител заданной специфичности в клетках млекопитающих

Цель. Получение универсальных генетических конструкций, кодирующих синтез легкой и тяжелой цепей химерного антитела, а также методических подходов для получения химерных антител заданной специфичности на примере моноклональных антител к дифтерийному токсину (ДТ) DT -17 в культуре клеток СНО и оценка их иммунохимических и эффекторных свойств. Материалы и методы. Методом ПЦР были получены гены вариабельных областей легких и тяжелых цепей мышиного антитела к дифтерийному токсину DT -17 и клонированы в плазмидном векторе pCI-neo. Генно-инженерными методами был получен «супервектор» SV DT-17neo, содержащий гены химерного антитела. С использованием культуральных методов «супервектором» была трансфицирована культура клеток СНО и получен высокопродуктивный клон, секретирующий химерные антитела к ДТ. Для оценки активности антител применяли иммунохимические методы, а для получения препаративного количества антител аффинную хроматографию. Результаты. Были получены универсальные векторы pLK DT-...

Научный журнал

ОПЫТ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ РАЗЛИЧНЫХ СПОСОБОВ ДОСТАВКИ ПЛАЗМИДНЫХ ВЕКТОРОВ ДЛЯ РЕДАКТИРОВАНИЯ ГЕНА МИОСТАТИНА В ФИБРОБЛАСТАХ ОВЦЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ СИСТЕМЫ CRISPR/CAS9

В статье приведены данные по результатам использования двух наиболее распространенных способов доставки плазмидных векторов для экспрессии CRISPR/Cas9 при редактировании гена миостатина в фибробластах овцы. Биохимическую трансфекцию клеток проводили с использованием реагента Lipofectamine®. Электропорацию осуществляли на приборе Multiporator 4308 (Eppendorf, Germany) с использованием буфера для электропорации Gene Pulser (BioRad, США). Для сборки редактирующей конструкции использовался коммерческий набор GeneArt® CRISPR Nuclease Vector with OFP Reporter Kit (Thermo Fisher Scientific, США). Целевая последовательность используемой РНК CRISPR гомологична области первого экзона гена миостатина. Эффективность трансфекции фибробластов с использованием метода липофекции и реагента Lipofectamine 3000 была на 16 % выше, чем с использованием метода электропорации и составила 28 %. Использование физического метода трансфекции негативно влияло на выживаемость клеток и отдельные показатели жизне...

Научный журнал

Повышай знания с онлайн-тренажером от Автор24!

  1. Напиши термин
  2. Выбери определение из предложенных или загрузи свое
  3. Тренажер от Автор24 поможет тебе выучить термины с помощью удобных и приятных карточек
Все самое важное и интересное в Telegram

Все сервисы Справочника в твоем телефоне! Просто напиши Боту, что ты ищешь и он быстро найдет нужную статью, лекцию или пособие для тебя!

Перейти в Telegram Bot