Генная терапия с использованием клеток зародышевой линии

A platform for studying molecular and cellular mechanisms of Parkinson’s disease based on human induced pluripotent stem cells

Цель исследования получение индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) от пациентов с различными формами болезни Паркинсона (БП) и создание на этой основе платформы для изучения патогенеза болезни на молекулярном и клеточном уровнях с разработкой протокола дифференцировки данных стволовых клеток. Материалы и методы. ИПСК получали из репрограммированных с помощью лентивирусных векторов и на основе вируса Сендай культивированных фибробластов кожи пяти пациентов с различными формами БП (PARK8, PARK2, GBA-ассоциированная и спорадическая формы). Полученные клоны ИПСК культивировали до стадии эмбриоидных тел и после спонтанной дифференцировки окрашивали иммуноцитохимически. Анализ экспрессии генов и нейрональных маркеров в этих линиях ИПСК проводили с помощью полимеразной цепной реакции, сопряженной с обратной транскрипцией. Результаты. Полученные клоны ИПСК имели нормальный кариотип 46 XY, специфично окрашивались антителами на маркеры плюропатентности Oct4, Nanog, TRA-1-81 и S...